第十七章  抗生素類藥物的分析

　　除一般雜質(zhì)檢查外，還收載有關(guān)物質(zhì)、聚合物檢查；異常毒性、降壓物質(zhì)、熱原、細(xì)菌內(nèi)毒素、無(wú)菌等安全性檢查項(xiàng)目。

第一節(jié) 青霉素鈉和青霉素鉀及其制劑的分析

　　青霉素族中的母核為6-氨基青霉烷酸(簡(jiǎn)稱6-APA)，游離羧基酸性，能與無(wú)機(jī)堿或某些有機(jī)堿成鹽。β-內(nèi)酰胺環(huán)不穩(wěn)定，遇酸、堿、青霉素酶及某些金屬離子等作用，易發(fā)生水解和分子重排，導(dǎo)致β-內(nèi)酰胺環(huán)的破壞而失去抗菌活性。

一、鑒別
1.HPLC
2.紅外光譜法
3.焰色反應(yīng)  鈉鹽火焰鮮黃色；鉀鹽紫色。

二、檢查
1.吸收度  側(cè)鏈苯環(huán)在264nm有最大吸收，而降解產(chǎn)物在280nm有最大吸收。測(cè)定264nm吸收度為控制青霉素鈉含量。規(guī)定280nm吸收度為控制雜質(zhì)限量。
2.聚合物：引起過(guò)敏性休克，分子排阻色譜法檢查，外標(biāo)法計(jì)算
3.水分：本品遇水易水解，費(fèi)休法測(cè)定水分不得超過(guò)0.5%。
4.細(xì)菌內(nèi)毒素  細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法。利用鱟試劑與細(xì)菌內(nèi)毒素發(fā)生凝集反應(yīng)，來(lái)判斷內(nèi)毒素是否符合規(guī)定。
5.無(wú)菌  滅活后，無(wú)菌檢查法檢查。

三、含量測(cè)定
反相高效液相色譜法，外標(biāo)法計(jì)算含量。
使用酸性流動(dòng)相使青霉素成為分子狀態(tài)，利于分離。

四、注射液青霉素鈉、鉀
鑒別相同
檢查：溶液澄清度與顏色、青霉素聚合物、水分、酸堿度、細(xì)菌內(nèi)毒素、無(wú)菌

第二節(jié) 阿莫西林及其制劑的分析
一、阿莫西林的分析
（一）鑒別：HPLC、紅外光譜法

（二）檢查
1．有關(guān)物質(zhì)：主要是降解產(chǎn)物。采用HPLC法，由于種類多、極性差異大，采用梯度洗脫法。
2．聚合物：分子排阻色譜法檢查
3．水分  含3分子結(jié)晶水，按費(fèi)休法測(cè)定含水應(yīng)為12.0～15.0％

（三）含量測(cè)定
高效液相色譜法，外標(biāo)法計(jì)算含量。

二、制劑分析
有關(guān)物質(zhì)限度略寬，口服制劑測(cè)定溶出度

第三節(jié)  頭孢羥氨芐及其制劑的分析
一、鑒別
1.HPLC  與對(duì)照品保留時(shí)間一致
2.紅外光譜法

二、檢查
1.有關(guān)物質(zhì)  主要檢查α－對(duì)羥基苯甘氨酸、7－氨基去乙酰氧基頭孢烷酸及其他有關(guān)物質(zhì)。采用HPLC法檢查。前兩者用對(duì)照品比較法，其他雜質(zhì)用高低濃度對(duì)比法。
2.水分  含1分子結(jié)晶水，按費(fèi)休法測(cè)定含水應(yīng)為4.2～6.0％

三、含量測(cè)定
高效液相色譜法，外標(biāo)法計(jì)算含量。
四、制劑分析
口服制劑測(cè)定溶出度，其他與原料藥同

第四節(jié)  硫酸慶大霉素及其制劑的分析
一、鑒別
1.茚三酮反應(yīng)  分子中有α－羥基胺結(jié)構(gòu)，可與茚三酮縮合成藍(lán)紫色化合物。
2.薄層色譜法
3.紅外光譜法

二、檢查
1.水分  按費(fèi)休法測(cè)定含水不得超過(guò)15.0％
2.硫酸鹽  配位滴定法
先加入定量過(guò)量氯化鋇滴定液，形成硫酸鋇沉淀。剩余Ba2+再用EDTA滴定液滴定。本品含硫酸鹽應(yīng)為32.0～35.0%。
3.細(xì)菌內(nèi)毒素
4.C組分檢查  HPLC
慶大霉素為C組分復(fù)合物，其不同C組分活性無(wú)明顯差異，但其毒副作用不同，需控制其相對(duì)含量。本品無(wú)紫外吸收，用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)

三、含量測(cè)定  微生物檢定法

四、制劑分析
注射液檢查pH值、顏色、無(wú)菌、細(xì)菌內(nèi)毒素；緩釋片檢查釋放度

第五節(jié) 鹽酸四環(huán)素及其制劑的分析
一、鑒別
1.三氯化鐵反應(yīng)：具酚羥基和烯醇結(jié)構(gòu)，與鐵離子形成紅色配合物
2.高效液相色譜法  供試品與對(duì)照品保留時(shí)間一致
3.紅外分光光度法  測(cè)定最大吸收波長(zhǎng)和相應(yīng)吸收度
4.氯化物鑒別反應(yīng)

二、檢查
1.有關(guān)物質(zhì)  主要是差向四環(huán)素、脫水四環(huán)素、差向脫水四環(huán)素和金霉素等。采用HPLC法檢查，加校正因子的主成份對(duì)照法
2.雜質(zhì)吸收度  控制本品中差向異構(gòu)體、脫水異構(gòu)體及其他雜質(zhì)。此類雜質(zhì)在530nm波長(zhǎng)有較強(qiáng)吸收，控制樣品在530nm吸收度，達(dá)到控制雜質(zhì)的目的。
3.酸度、溶液澄清度、熱原、無(wú)菌

三、含量測(cè)定
HPLC，外標(biāo)法計(jì)算。

四、制劑分析
片劑、膠囊劑雜質(zhì)限度有所放寬，需測(cè)定溶出度

第六節(jié) 羅紅霉素及其制劑的分析
一、鑒別
1.HPLC
2.紅外光譜法

二、檢查
1.堿度  測(cè)定pH值
2.有關(guān)物質(zhì)  HPLC，主成份自身對(duì)照法
3.水分  按費(fèi)休法測(cè)定含水不得超過(guò)3.0％

三、含量測(cè)定  HPLC，外標(biāo)法計(jì)算

四、制劑分析
有關(guān)物質(zhì)限度有所不同