(1)原理：硝酸鹽還原反應(yīng)包括兩個過程：一是在合成過程中，硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨，再由氨轉(zhuǎn)化為氨基酸和細胞內(nèi)其他含氮化合物;二是在分解代謝過程中，硝酸鹽或亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統(tǒng)中的終末受氫體。能使硝酸鹽還原的細菌從硝酸鹽中獲得氧而形成亞硝酸鹽和其他還原性產(chǎn)物。但硝酸鹽還原的過程因細菌不同而異，有的細菌僅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，如大腸埃希菌;有的細菌則可使其還原為亞硝酸鹽和離子態(tài)的銨;有的細菌能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮，如假單胞菌等。硝酸鹽還原試驗系測定還原過程中所產(chǎn)生的亞硝酸。

　　(2)培養(yǎng)基：硝酸鹽培養(yǎng)基。

　　(3)試劑：甲液(對氨基苯磺酸0.8g+5mol/L醋酸lOOml;乙液(α-奈胺0.5g+5mol/L醋酸lOOml)。

　　(4)方法：被檢菌接種于硝酸鹽培養(yǎng)基中，于35℃培養(yǎng)l～4d.將甲、乙液等量混合后(約0.1m1)加入培養(yǎng)基內(nèi)，立即觀察結(jié)果。

　　(5)結(jié)果：出現(xiàn)紅色為陽性。若加入試劑后無顏色反應(yīng)，可能是：①硝酸鹽沒有被還原，試驗陰性;②硝酸鹽被還原為氨和氮等其他產(chǎn)物而導致假陰性結(jié)果，這時應(yīng)在試管內(nèi)加入少許鋅粉，如出現(xiàn)紅色則表明試驗確實為陰性。若仍不產(chǎn)生紅色，表示試驗為假陰性。

　　若要檢查是否有氮氣產(chǎn)生，可在培養(yǎng)基管內(nèi)加一小倒管，如有氣泡產(chǎn)生，表示有氮氣生成。

　　(6)應(yīng)用：本試驗在細菌鑒定中廣泛應(yīng)用。腸桿菌科細菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽;銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌等假單胞菌可產(chǎn)生氮氣;有些厭氧菌如韋榮球菌等試驗也為陽性。