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    臨床助理醫(yī)師考試

    2014臨床助理《微生物學(xué)》講義:第二十五單元

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      點(diǎn)擊查看:2014臨床助理醫(yī)師《微生物學(xué)》復(fù)習(xí)講義匯總

      第二十五單元 病毒感染的檢查方法和防治原則

      重點(diǎn)提示

      本單元2000~2009年約考過l題。

      本單元題量不大。考生應(yīng)重點(diǎn)掌握病毒感染免疫預(yù)防中主動免疫和被動免疫的特點(diǎn)及常用制劑。熟悉病毒分離培養(yǎng)方法、病毒感染的血清學(xué)診斷方法。了解標(biāo)本的采集和送檢。

      考點(diǎn)串講

      一、病毒感染的檢查方法

      (一)標(biāo)本的采集與送檢

      1.供分離病毒、檢出核酸及抗原的標(biāo)本采集原則

      (1)標(biāo)本采集時間:在發(fā)病初期(急性期)采集標(biāo)本,較易檢出病毒。

      (2)標(biāo)本采集部位:最好在感染部位采取。

      (3)標(biāo)本運(yùn)輸:盡快冷藏送檢,標(biāo)本在處理、接種前切忌反復(fù)凍融,病變組織則應(yīng)保存于50%的甘油緩沖鹽水中。

      (4)標(biāo)本的處理與儲存:采集標(biāo)本時要注意無菌操作。臨床標(biāo)本中可加入高濃度的抗生素。盡量及時接種,如不能當(dāng)時接種,標(biāo)本應(yīng)保存在一70℃低溫冰柜或液氮中。

      2.供血清學(xué)檢測的標(biāo)本采集原則 檢測特異性抗體需要采取急性期與恢復(fù)期雙份血清,血清標(biāo)本應(yīng)在一20℃保存,試驗前血清標(biāo)本以56℃30min處理去除非特異性物質(zhì)及補(bǔ)體。

      (二)病毒分離

      1.細(xì)胞培養(yǎng)

      (1)培養(yǎng)細(xì)胞分類

     、僭(xì)胞:常用人胚腎、猴腎、雞胚等原代細(xì)胞,對病毒的敏感性高,可用于生產(chǎn)病毒疫苗,但不能持續(xù)傳代培養(yǎng),故不便用于診斷。

     、诙扼w細(xì)胞:染色體數(shù)為二倍體,生長迅速,并可傳50代保持二倍體特征,可用于制備病毒疫苗,也可用于病毒的實驗室診斷。

     、蹅鞔(xì)胞系:由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而來,染色體數(shù)為非整倍數(shù),細(xì)胞生長迅速,可無限傳代,在液氮中能長期保存,目前廣泛用于病毒的實驗室診斷。

      (2)細(xì)胞培養(yǎng)中病毒的鑒定

     、俨《驹诩(xì)胞內(nèi)增殖的特征:細(xì)胞病變效應(yīng)、紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象、干擾現(xiàn)象。

     、诓《靖腥拘缘亩繙y定:空斑形成單位測定、50%致死量(LD50)和50%組織細(xì)胞感染量(TCID50)的測定、病毒形態(tài)與結(jié)構(gòu)的觀察。

     、鄄《镜牟≡瓕W(xué)鑒定。

      2.動物接種 常用大鼠、小鼠、豚鼠、家兔和猴等動物。

      3.雞胚接種

      (三)病毒抗原的檢測

      1.免疫熒光法

      2.酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)

      (四)病毒抗體的檢測

      1.中和試驗 病毒在活體內(nèi)或細(xì)胞培養(yǎng)中被特異性中和抗體作用而失去感染性的一種試驗。

      2.補(bǔ)體結(jié)合試驗 常用病毒內(nèi)部可溶性抗原檢測血清中IgM類抗體。

      3.血凝抑制試驗

      (五)病毒核酸的檢測

      1.核酸雜交技術(shù) 包括斑點(diǎn)核酸雜交、細(xì)胞內(nèi)原位雜交、DNA印跡雜交和RNA印跡雜交等。

      2.PCR技術(shù)

      3.高通量的病毒核酸檢測技術(shù)

      二、病毒感染的防治原則

      (一)病毒感染的免疫預(yù)防

      1.人工主動免疫 預(yù)防病毒感染的人工主動免疫生物制品主要有減毒活疫苗、滅活疫苗、基因工程疫苗及核酸疫苗等幾類。

      2.人工被動免疫 人工被動免疫是指注射含有抗病毒中和抗體的免疫血清、丙種球蛋自和IL-2,以及與細(xì)胞免疫有關(guān)的轉(zhuǎn)移因子、干擾素等,使機(jī)體立即獲得特異性免疫力(2001)。常見人工被動免疫生物制劑有:普通免疫球蛋白、抗病毒血清、免疫調(diào)節(jié)劑等。

      (二)抗病毒治療

      1.化學(xué)治療

      2.免疫治療 ①免疫調(diào)節(jié)或治療劑。②治療性疫苗。③免疫細(xì)胞的修飾和回輸。

      3.基因治療

      歷年經(jīng)典試題

      某護(hù)士在給一位乙型肝炎病毒(HBV)攜帶者注射時,不慎被病人用過的針頭刺傷手指。為預(yù)防乙型肝炎病毒感染,應(yīng)首先采取的措施是(B)

      A.注射抗生素

      B.注射丙種球蛋白

      C.注射乙型肝炎疫苗

      D.注射HBIg

      E.注射α-干擾素

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